程颖：可逆细胞在小细胞肺癌临床研究中的进展

循环巨噬细胞( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检发现地”，已在移到性乳脑瘤、癌和结直肠癌之中使用生存率赞赏。小巨噬细胞膀胱癌(Small celllung cancer，SCLC)一个组织发现地来源不足，且依赖于必需的检测发作移到和预见生存率的生物体一个大。数年来研究成果者CTCs在SCLC之中的医学广泛应用应用展开了探险性研究成果，发现CTCs对SCLC的病因、分段，检测发作、移到，当前、生存率以及建立个体化病患可在行性等兼具不可忽视本质，本文就CTCs在SCLC医学广泛应用应用之中的研究成果进展应研究报告。

一、SCLC病患者CTCs的探测步骤

CTCs的探测步骤主要有流式巨噬细胞探测应用( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶链催化(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTC芯片(CTC-chip)应用和膜滤过除去巨噬细胞应用(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其之中CellSearch系统因其半自动化的操作平台，较高的甲基化、危险性和可重复性，成为最常广泛应用应用的CTCs探测步骤。

早在2004年，Allard等率先广泛应用应用CelISearch规探测了99亦然膀胱癌（未列举SCLC亦然数）病患者的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip规探测了55亦然膀胱癌病患者泌尿系统鲜血C TCs。2009年直至的研究成果多采用CeIISearch规探测SCI．C病患者泌尿系统鲜血CTCs，然而该步骤由于对依赖于上皮巨噬细胞特质的巨噬细胞不会用到漏检可能不会，且与免疫磁珠及抗体结合的CTCs无规在行某些后续的探测，医学广泛应用应用受到受限。

数年来，随着纳米高科技的发展，抗病毒CTCs表面一个大的甲基化识别分f修饰的纳米材料结合微流控应用的CTCs探测平台的研究成果受到广泛应用关注，2013年，《其本质》（Nature）杂志将CTCs纳米探测选为最具创新性和转化潜力的病因新步骤，成果大放异彩。但就目前来看，现有的CTCs探测步骤各有利弊，未有研究成果证实哪种步骤对SCLC的CTCs探测更是有占优。着眼将来，迫切需要开发甲基化、危险性更是高的CTCs探测应用，为SCLC的基础和医学研究成果带来突破。

二、CTCs在SCLC医学广泛应用应用之中的研究成果现状

（一）CTCs计算与SCLC的病因、分段

数年来多项研究成果显示CTCs计算低水平与SCLC的病因、分段有紧密联系0 2009年Tanaka等广泛应用应用CeIISearch规探测了1 50亦然7.5ml泌尿系统鲜血CTCs，其之中膀胱癌1 25亦然、非恶性25亦然，膀胱癌病患者之外116亦然非小巨噬细胞膀胱癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9亦然SCLC。

研究成果结果显示SCLC病患者CTCs阳性率为66.70-/0（6亦然／9亦然），值得注意高于NSCLC病患者的CTCs阳性率(脑瘤25.9%，鳞癌40.9%；脑瘤对比SCLC，P

同年，Hou等广泛应用应用CeIISearch规探测了50亦然初治的SCLC病患者泌尿系统鲜血CTCs，之外20亦然受限期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病患者和30亦然广泛应用期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病患者，两条线期ED-SCLC及LD-SCLC病患者的之中位CTCs计算计有237和2个/7.5ml鲜血，7亦然未检出CTCs的病患者均为LD-SCLC，断言CTCs计算低水平与SCLC分段方面。

十分相似的论点在2012年被日本学者Naito等证实，研究成果者在51亦然SCLC病患者之中立用CeIISearch规探测两条线期CTCs低水平，结果显示ED-SCLC,病患者的之中位CTCs计算为9.5个f 7.5ml鲜血，而LD-SCLC仅为1个／7.51111鲜血，更进一步断言ED-SCLC病患者的CTCs低水平高于LD-SCLC病患者。

（二）CTCs当前SCLC的及生存率

CTCs否可作为当前SCLC和生存率的有救指f,楔研究成果者们一直在探讨的情况。Houi等在2009年通过CellSearch规探测了50亦然SCLC病患者(LD-SCLC20亦然，ED-SCLC30亦然)的CTCs，发现CTCs>300个/7.5ml鲜血的病患者及CTCs

两条线期CTCs>=50和

在该研究成果之中SCLC病患者的生存率界定参数的游戏8个/7.5ml鲜血，以此将病患者分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年比如说广泛应用应用CellSearch规探测59亦然SCLC病患者在两条线期、1间隔治疗后及4间隔治疗结束后外固鲜血CTCs低水平，其之中ED-SCLC病患者38亦然，LD-SCLC病患者2 1亦然c两条线期有43亦然病患者(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml鲜血，CTCs>215个/7.5ml鲜血和CTCs

经过1间隔治疗后病患者CTCs低水平值得注意降低，且1间隔治疗后CTCs

研究成果者推断CTCs低水平是SCLC生存率的实质上影响突变，其之中1间隔治疗后CTCs低水平是SCLC和生存率超群的预见突变。

2013年ASCO刊登的ECOG1508研究成果之中，研究成果者想规在155亦然ED-SCLC之中重新加入抗病毒病患，并对其之中123亦然病患者两条线期CTCs展开探测，结果显示抗病毒病患未能延长ED-SCLC病患者的PFS和OS，但发现两条线期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml鲜血的mPFS计有4.4和4.3个翌年（P=0.07），OS计有10.7和7.2个翌年(P=0.01)。研究成果者认为虽然抗病毒病患没能减低ED-SCLC病患者的PFS和OS，但却发现了CTCs可能不会是SCLC病患者的生存率一个大。

最数，Igawa等想规广泛应用应用OBP-401试验中探测SCLC病患者泌尿系统鲜血CTCso广泛应用应用OBP-401试验中探测乳脑瘤和肺炎病患者CTCs的方面研究成果已有前期报道。研究成果纳入30亦然韧治的SCLC病患者，29亦然病患者(96%)泌尿系统鲜血CTCs阳性。在两条线期，21亦然病患者CTCs

（三）CTCs检测SCLC的发作和移到

现有的研究成果声称通过探测CTCs的用到来检测SCLC的发作和移到兼具不可忽视的医学本质o Tanaka等研究成果发现CTCs低水平‘j 125亦然膀胱癌病患者（之外9亦然SCLC病患者）进展值得注意方面，比如说是与高处移到密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些图表，作者认为CTCs可作为检测膀胱癌高处移到的生物体标记物。Natio等研究成果发现SCLC在两条线期、病患结束后及发作后CTCs的阳性率计有68.6%、26.5%和67.6，上不会SCLC发作后泌尿系统学CTCs低水平增大，暴发高处移到脏器的数量为0、1和>=2的病患者其之中位CTCs计算计有2.0、7.5和21个/7.5ml鲜血,上不会CTCs低水平与高处移到脏器的数量有关，高处移到越多，CTCs计算越（p

三、CTCs在SCLC医学广泛应用应用之中的探险方向

发作和移到是加剧病患者病患失败和死亡的主要诱因，及时发现的发作和移到并采敢尽力必需的病患措施可显著减低病患者生存率。然而，由于SCLC依赖于能够检测发作和移到的生物体一个大，且常规某类检查无规发现微移到灶及微小残留皮下，加剧暴发发作和移到的SCLC病患者不能及时接受病因和病患。

医学之中部分LD-SCLC的病患者生存率歧异较大，上不会有些受限期的病患者在病因时可能不会已暴发了某类不能发现的微移到而成为潜在的广泛应用期病患者。通过探测泌尿系统鲜血CTCs的用到及数量变动从而对SCLC病患者体内状态展开实时、动态地检测和赞赏，及时发现的发作、移到，将有助于医学医生对病患适时的把握和病患化解可在行性的选择，但否是CTCs的数量或变动参数为多少时能够精确反映SCLC的发作或移到唯不明确，需更是多的循证医学证据应支持。

CTCs在当前SCLC病患者病患方面的广泛应用应用唯处于探险阶段，病患过程之中CTCs数量的变动与SCLC病患者治疗的方面性及其与SCLC病患者化学疗法适时的选择等情况在将来需大量的医学研究成果。数5年，对CTCs否可作为SCLC病患者生存率当前的研究成果逐渐增大，但SCLC最佳的生存率CTCs界定参数唯无定论，争议颇多。

其之中3项来自Hou、Naito、Hiltermann的研究成果将SCLC的生存率CTCs欠定参数分别的游戏为50、8和2个／7.5ml鲜血，歧异很大，这可能不会与研究成果采用的统计学步骤不尽相同以及入组样本量较少有关。数期意大利学者Normanno等论者将ED-SCLC和LD-SCLC病患者分离研究成果，对两条线期、l间隔治疗后CTCs以及病患前后CTCs的变动参数分别的游戏生存率界定参数，为将来的研究成果提供者了新的思路。笔者所在的科研院所团队也自始己任我国SCLC病患者生存率最佳CTCs界定参数的研究成果，结果有点希望。

的个体化病患是病患模式的发展方向。SCLC病患者对治疗抗生素的催化存在值得注意的变异，其主要诱因可能不会与精细的异质性、基因表达歧异及多态性有关。所以，逐步明晰SCLC的原核生物学特质对发挥作用真自始本质上的SCLC个体化病患尤为不可忽视。数期我国学者王洁等研究成果人员通过广泛应用应用单巨噬细胞基因测序手段对病患者单个CTC展开均原核生物、外显子原核生物测序。

在此项研究成果之中，谢晓亮教授研制出的多重熔融和环化循环的增量应用(MAIBAC)，事与愿违发挥作用了对病患者泌尿系统鲜血单个CTC的均原核生物增量和深度测序，在单个巨噬细胞低水平探测均原核生物基因拷贝数变异(CNVs)和单碱基变异(SNVs)o单巨噬细胞低水平CTCs原核生物测序应用可及时提供者如抗药性基因突变等个体化病患所需的不可忽视信息，同时也为将来SCLC抗病毒抗生素的开发提供者应用支持。

SCLC一个组织发现地难以获取，受限制了后续各项除此以外研究成果的开展，而利用CTCs构建的SCLC循环巨噬细胞植入瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，下半年化解这一棘手难题。最数，Hodgkinson等想规将6亦然ED-SCLC病患者lOml泌尿系统鲜血之中的CTCs提取后注射到免疫缺陷小鼠皮下，结果在4只小鼠身上构成了CDXs，断言SCLC病患者的CTCs兼具致瘤性。

同时广泛应用应用CelISearch规探测这6亦然SCLC病患者的CTCs，结果显示事与愿违构成CDXs的4亦然病患者的CTCs计算均>400个／7.5ml鲜血，而另外2亦然未构成CDXs的病患者其CTCs计算计有222和20个／7.5ml鲜血，上不会SCLC的CTCs致瘤性与泌尿系统鲜血CTCs教量有关。更进一步分析发现相较于治疗危险性SCLC，治疗抗药性性SCLC病患者的CDXs大大降低一段时间短、生长更是迅速。对3亦然CDXs给予顺铂和依托泊苷治疗抗生素，其危险性先后顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病患者的OS计有9.7.3.5.0.9个翌年，上不会对CDXs展开肾脏药敏试验中可以间接催化病患者生存一段时间。

该研究成果显示部分SCLC的泌尿系统鲜血CTCs兼具干巨噬细胞功能性，可展开肾脏培植、构成与原发离地十分相似的CDXs，为SCLC病患者的肾脏药敏试验中、抗药性选择性分析等一系列除此以外研究成果提供者了足量的一个组织，化解了SCLC病患者发现地来源不足的情况。

论点

从现在行的研究成果可以看出，虽然CTCs在SCLC之中的医学广泛应用应用仍处于探险阶段，但无疑广阔。目前，诸多转化性研究成果自始在展开之中，相信随着研究成果的不断深入，CTCs下半年成为SCLC的突破口，希望CTCs在SCLC的领域之中为我们带来惊喜。

编辑： 雪